样品介绍:皮肤作为身体与环境之间的隔绝屏障,是抵御外界物理和生物侵害的第一道防线。皮肤中包含多种免疫细胞。多数据表明驻留在皮肤中的免疫细胞具有免疫监视的功能。因此皮肤研究也是众多学者的课题之一。
实验样品:小鼠皮肤组织
实验目的:本次实验是小鼠背部和尾巴上的皮肤,利用单细胞悬液制备仪消化后得到单细胞混悬液,用于后期做流式细胞分析
实验设备:
单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-4WK
实验过程:
1. 准备单细胞悬液制备仪JX-CKSM-4KW一台,配套试剂及耗材12份。
2.用冷水解冻消化酶和终止液。
3.试剂解冻后,准备好试验样品。选取小鼠背部皮肤和尾部皮肤各100mg,用手术剪剪成糊状,加入装满消化酶的样品管内。
4.打开仪器电源,将样品管放入单细胞悬液制备仪的管架上,选中管架加热,点击启动,管架加热3-5分钟。
5. 管架加热结束后,将样品管放到模块上,选择程序4,选中模块加热,点击启动。
6.仪器运行结束后,自动停止,用40um滤网过滤,加入终止液终止消化(消化液:终止液1:2)
7.放到冷冻离心机上离心,离心后弃掉上清,加一定量终止液进行重悬,重悬后的混悬液就是我们需要的单细胞混悬液。
实验结果:制备效果好
实验对比:
样品制备前后效果图
注意事项:
1、为了保证实验效果,整个实验过程,样品操作都在冰上进行。
2、配套试剂盒需要-20℃保存,使用前用冷水解冻,解冻后放在冰上。使用结束后继续放到-20℃保存。
流式细胞分析都需要制备单细胞悬液。实体组织样品和肿瘤在分析前需要处理成单细胞悬液。无论在何种情况之下,好的细胞得率和细胞活率对后续实验都是至关重要的。单细胞悬液制备仪是一款具备集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,可用于流式细胞术、原代细胞培养、单细胞测序等实验,具有起始量小,时间短,细胞得率高等特点。