实验目的:为了在释放胞内蛋白的同时能够保证蛋白质的生物活性,需要对大肠杆菌进行破壁,表达目的蛋白,故而此次实验选用上海净信高压均质机GSL-1.5Pro对大肠杆菌进行破碎实验,详细如下:
实验室选用仪器:

高压均质机 GSL-1.5Pro
实验开始前先了解一下注意事项:
1、严禁在无物料的情况下带压空运行。
2、设备运行过程中进料不可间断,如进入空气可用排气针进行排气,不可用力使用排气针防止陶瓷球错位,影响均质效果。
3、大肠杆菌在均质时排空会较多气泡属于正常情况。
4、使用结束后,用75%酒精进行封存。
实验步骤:
1、 准备净信的高压均质机,标配款冷水机一台。
2、冷水循环机加入纯水至MAX刻度线,温度设置2℃提前20min打开循环预冷。
3、主机打开后,进行清洗。先把酒精0压力排空,再用100ml纯水加压100bar清洗一遍,再用纯水0压力清洗一遍,待冷水机温度达到实验均质要求后,即可开始操作。
4、准备30ml大肠杆菌菌液,往料杯中倒入菌液进行均质,循环次数为两次,压力为800-1000bar左右。
5、达到效果后用离心管接住,直至排空。
6、均质完成后,需加纯水再次进行上述清洗步骤清洗一遍,清洗完毕后,往料杯口加入75%酒精进行封存,防止滋生细菌,以备下次使用。
实验效果:

(大肠杆菌用高压均质机均质前后效果图)

(即刻离心后效果展示)
上图为30ml大肠杆菌菌液在800-1000bar左右压力下,均质两次并离心后的效果,达到老师预期效果。老师之前上学时用的其他品牌的均质机,但是这次用过净信GSL系列均质机后,反馈上海净信的高压均质机使用效果更好,清洗也方便,还能够连续均质。性价比也高,能够更好地解决样品的均质问题。