实验背景
酵母菌有多种类型,被广泛应用于食品、医药等领域的实验研究。酵母菌具有发酵生产成本低、生物合成能力高、安全无毒、繁殖能力强且易于培养等优点,使其成为重要的模式生物。在对酵母菌进行各种研究的同时,其细胞的破碎率、破碎后蛋白质和核酸的得率对后续实验研究起到了十分重要的作用。
实验目的:为完成对酵母菌样品的均质破碎,提取核酸,查看转录的目的基因,检验转录是否成功。
实验材料:酵母菌细胞悬液
实验仪器:
高压均质机JXNANO-15
实验操作:
1、使用2根胶管将冷水机的进出水口和主机出料冷却器连接。
2、冷水机加水,打开冷水机进行预冷。
3、冷水机达到预设温度后,确保压力阀门处于松弛的状态下,打开电源开关。
4、进料口处(料斗)先加入适量的水,排除管道内的空气。
5、等待进料杯水快完全进入进料口时,加入100ml的酵母菌,调节压力1200bar~1600bar(120mpa~160mpa),进行均质,重复三遍,得到均质样品。
6、均质后将样品接入干净的容器中。
7、处理完样品后,先卸压,将泵体内残留液排尽。
8、再加入清水,进行清洗。
实验效果:
样品均质前后效果对比图
高压均质机对酵母菌样品的破壁实验时间短、细胞破碎率高、核酸提取度高,对后续的实验研究很有帮助。高压均质机不仅对细胞破碎有良好的效果,对悬浮液(或乳化液)的均质效果也非常理想;它可降低分散物尺度,使分散物分布更均匀,在生物技术和制药领域有广泛的应用。